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炭疽毒素保護(hù)抗原(Cat#171E Anthrax Protective Antigen)
產(chǎn)品組成:
每瓶含0.6mg炭疽毒素保護(hù)抗原。用500ul水重懸后,為含0.6mg炭疽毒素保護(hù)抗原的0.005mol/L Hepes,0.05mol/L 氯化鈉,pH7.4的緩沖液。溫和操作,不要渦旋混勻。
產(chǎn)品保存:
產(chǎn)品為凍干粉,保存于2-8℃。 用水重懸后,保存于2-8℃,并在數(shù)小時(shí)內(nèi)盡快使用。如果長(zhǎng)期不用的話,保護(hù)抗原和致死因子在活細(xì)胞的中的活性會(huì)下降。如果必須保存溶液,請(qǐng)重懸至1mg/ml濃度,用1mg/ml的BSA重懸會(huì)增加蛋白的穩(wěn)定性,可以分裝-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。蛋白按以上濃度重懸后,加入50%冷的甘油,冷凍保存。用1mg/ml的BSA重懸2-8℃可以放2周。
濃度:
蛋白濃度通過測(cè)定1mg/ml溶液中280nm處吸光度(消光系數(shù)0.97)獲得。
純度:
經(jīng)4-12% SDS-PAGE電泳,出現(xiàn)單一的分子量為83kDa的條帶。光密度分析純度>90%。
產(chǎn)品經(jīng)內(nèi)毒素檢測(cè),內(nèi)毒素為:1EU/mg(每個(gè)批次可能不同個(gè))
活化:
對(duì)于某些檢測(cè)系統(tǒng),此產(chǎn)品可能需要胰蛋白酶消化產(chǎn)生C端的63kD 片段。
細(xì)胞毒活性:
用0.5ug/ml的炭疽毒素保護(hù)抗原處理J774A.1細(xì)胞,檢測(cè)不到毒性。當(dāng)和炭疽毒素致死因子結(jié)合后,可以達(dá)到細(xì)胞毒活性要求。
組織培養(yǎng)應(yīng)用:
對(duì)于組織培養(yǎng),培養(yǎng)基中的谷氨酰胺必須是新鮮的。如果谷氨酰胺破壞會(huì)釋放銨離子,會(huì)阻止核仁酸化,從而抑制炭疽毒素致死因子進(jìn)入細(xì)胞漿。因此必須用:穩(wěn)定性好的谷氨酰胺。
防護(hù):
操作時(shí),請(qǐng)穿上實(shí)驗(yàn)服,帶上手套和防護(hù)眼鏡。此產(chǎn)品僅供科研應(yīng)用,不可用于診斷試劑。
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